植物乳桿菌是一種桿狀的兼性厭氧乳桿菌,能夠?qū)Σ≡纳L進(jìn)行抑制,從而調(diào)節(jié)消化道菌群平衡。益生菌微膠囊技術(shù)可以保護(hù)益生菌活細(xì)胞免受不利環(huán)境因素的影響并將其傳遞到腸道。液滴微流控技術(shù)因?yàn)榭梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)微膠囊粒徑、形態(tài)結(jié)構(gòu)和組分來提高生物活性物質(zhì)的包埋率和控釋,為微囊化研究提供了一個新平臺。然而,單個微流控器件的生產(chǎn)率較低,亟需開發(fā)能夠并行操作多個微流控液滴生成器(microfluidic droplet generator,MFDG)的陣列芯片,使高通量制備微膠囊成為可能。
據(jù)麥姆斯咨詢報(bào)道,基于此,來自上海理工大學(xué)的研究人員設(shè)計(jì)并加工了集成多個MFDG的微流控芯片,研究了梯度分布和樹狀分布兩種流體分布層結(jié)構(gòu),以及平行陣列和圓形陣列兩種液滴生成器模式對液滴生成的影響,實(shí)現(xiàn)了對植物乳桿菌微膠囊的高通量制備。相關(guān)研究發(fā)表于《食品與發(fā)酵工業(yè)》期刊。
高通量芯片流體分布層結(jié)構(gòu)
高通量芯片流體層分為梯度分布和樹狀分布兩種結(jié)構(gòu)。如圖1a所示,梯度分布由連續(xù)相通道、分散相通道、一個公共出口通道以及在水平方向上排布的多個MFDG組成。圖1b所示樹狀分布結(jié)構(gòu)芯片主要由連續(xù)相樹狀分布層、分散相樹狀分布層與每個樹狀分支末端匹配的MFDG組成。圖2為兩種分布芯片實(shí)物圖。
圖1 梯度分布芯片結(jié)構(gòu)示意圖
圖2 微流控芯片實(shí)物圖
高通量芯片液滴生成器結(jié)構(gòu)
高通量芯片液滴生成器分為平行陣列和圓形陣列兩種結(jié)構(gòu),圖3為平行陣列和圓形陣列芯片實(shí)物圖。平行陣列是指液滴生成器集成層中各MFDG的排列方式為平行模式,多個MFDG(8、16、32)在水平方向上依次排開。圓形陣列是指液滴生成器集成層中各MFDG的排列方式為圓形模式,多個MFDG(8、16、32)以圓心為中心陣列排開。
圖3 兩種陣列芯片實(shí)物圖
梯度分布和樹狀分布制備微液滴
在連續(xù)相流速為500μL/min,分散相流速為50μL/min的固定流速下,液滴在8個并行通道中產(chǎn)生,每個單一通道的液滴呈單分散性,但8個通道液滴大小及生成頻率略有不同,這可能是共用一條公共入口通道和各平行液滴發(fā)生器之間的“串?dāng)_”引起的。雖然兩種流體分布的芯片均存在這種現(xiàn)象,但由于梯度分布結(jié)構(gòu)的不對稱性,流體到達(dá)各MFDG時的流阻不一致,流體分布不均,從而導(dǎo)致各通道產(chǎn)液滴的頻率差異較大。其中,樹狀分布的芯片從入口到各MFDG的通道長度相同,能實(shí)現(xiàn)流體的對稱均勻分布,各通道產(chǎn)生液滴的頻率差異較小。同時,樹狀對稱結(jié)構(gòu)分布的微通道更傾向于單分散液滴的形成,滿足植物乳桿菌微膠囊單分散性的要求。在兩相流速比恒定為15,同時改變兩相流速的條件下,分別用兩種種分布結(jié)構(gòu)陣列芯片制備微液滴,結(jié)果如表1所示。
表1 兩種微流控器件制備的微膠囊的平均尺寸及其分布
平行陣列和圓形陣列制備微液滴
在樹狀分布的基礎(chǔ)上,制作集成8、16、32個MFDG的平行陣列和圓形陣列芯片,在相同面積條件下,圓形陣列對板材的利用率是平行陣列的200%,可見圓形陣列在空間結(jié)構(gòu)上更高效。接著,分別用平行陣列芯片和圓形陣列芯片制備微液滴,由于流動分布性能的不同,在平行陣列和圓形陣列中產(chǎn)生的液滴的平均尺寸有所不同,圖4為MFDG個數(shù)對平行陣列和圓形陣列芯片液滴的平均粒徑(a)及其變異系數(shù)(b)的影響。從圖4中可以看出,隨著MFDG個數(shù)的增加,流體分布的誤差增大,導(dǎo)致兩種陣列制備的液滴的平均直徑和變異系數(shù)均呈上升趨勢。相比之下,圓形陣列制備的液滴直徑大小和變異系數(shù)更小,呈現(xiàn)單分散性。由此可見,流體分布不平衡是液滴多分散性的主要影響因素,圓形陣列相對平行陣列來說更能促進(jìn)均勻的流體輸送,適用于單分散液滴的高通量制備。
圖4 MFDG個數(shù)對平行陣列和圓形陣列芯片液滴生成的影響
不同流速比對高通量制備微膠囊的影響
將16個MFDG集成在基于樹狀分布的圓形陣列芯片中,在不同流速比下制備植物乳桿菌微膠囊,其粒徑大小、粒徑分布、生成頻率及包埋率結(jié)果如表2所示。隨著流速比的增加,植物乳桿菌微膠囊粒徑呈減小趨勢,而生成頻率呈增加趨勢,而液滴的穩(wěn)定性逐漸下降。由于流速比為10和12時,生成液滴的頻率較慢,流速比為20時,生成液滴的穩(wěn)定性不佳,液滴生成后期出現(xiàn)流體掛壁、拖尾、噴射等現(xiàn)象,液滴生成失控。綜合考慮,選取流速比為15為最佳流速比。圖5為高通量陣列芯片制備所得微膠囊,可以看出微膠囊的粒徑分布均勻,形狀較為規(guī)則。
表2 不同流速比制備植物乳桿菌微膠囊的結(jié)果
圖5 高通量微流控陣列芯片制備的微膠囊
綜上所述,研究人員設(shè)計(jì)了集成多個微流控液滴生成器的陣列芯片,以液滴直徑大小、變異系數(shù)及液滴生成頻率為評價(jià)指標(biāo),比較了兩種流體分布層結(jié)構(gòu)以及兩種液滴生成器模式對液滴生成的影響。結(jié)果表明,樹狀分布的微通道間壓力較平衡,更能實(shí)現(xiàn)流體的均勻輸送;圓形陣列更有利于單分散液滴的形成。選擇樹狀分布的圓形陣列芯片應(yīng)用于植物乳桿菌的包埋,當(dāng)流速比為15時,液滴生成頻率為20.3Hz,包埋率為96.4%,實(shí)現(xiàn)了植物乳桿菌的高效率封裝和受控釋放。該研究為高通量制備益生菌微膠囊提供了新思路。
論文鏈接:
http://dx.doi.org/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.032205
審核編輯 :李倩
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原文標(biāo)題:高通量微流控液滴生成器陣列芯片用于植物乳桿菌微膠囊的制備
文章出處:【微信號:Micro-Fluidics,微信公眾號:微流控】歡迎添加關(guān)注!文章轉(zhuǎn)載請注明出處。
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