具有一個(gè)或多個(gè)未成對(duì)電子的Mn順磁離子具有出色的弛豫系數(shù),其在水溶液中穩(wěn)定,可通過(guò)氧化還原反應(yīng)轉(zhuǎn)換多種價(jià)態(tài),從而克服了傳統(tǒng)磁弛豫開(kāi)關(guān)傳感器穩(wěn)定性低(受食物基質(zhì)和自然沉降的干擾)和工作范圍窄(小分子結(jié)合位點(diǎn)有限)的缺陷。Mn(II)順磁性離子(3d?,S=5/2)被廣泛用作磁共振成像的造影劑,具有較大的弛豫系數(shù)。
相比之下,MnO?NPs納米顆粒(晶格:八面體結(jié)構(gòu))中的Mn原子與六個(gè)O原子配位,因此與水質(zhì)子接觸的概率較低,導(dǎo)致MnO?NPs納米粒子具有弱弛豫性。然而抗壞血酸能迅速裂解MnO?NPs納米顆粒并釋放出Mn(II),從而顯著提高弛豫性。因此,可以構(gòu)建基于順磁離子價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)換的弛豫傳感系統(tǒng)。
諾如病毒(NoV)俗稱“冬季嘔吐病”,是急性病毒性腸胃炎的主要病因。諾如病毒具有高度傳染性,食源性NoV爆發(fā)與食用受糞便污染的生貝類、漿果和即食食品有關(guān)。此外,開(kāi)放的食品跨境貿(mào)易政策也促進(jìn)了全球疫情的爆發(fā)。因此,在食物攝入前檢測(cè)NoV病毒對(duì)于預(yù)防NoV感染具有相當(dāng)大的潛力。
近期,上海理工大學(xué)劉寶林教授團(tuán)隊(duì)與軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院環(huán)境醫(yī)學(xué)與作業(yè)醫(yī)學(xué)研究所高志賢研究員團(tuán)隊(duì)合作,報(bào)道了一種基于Mn順磁弛豫和納米催化的多信號(hào)生物傳感器來(lái)檢測(cè)NoV病毒的方法。該雙模態(tài)傳感平臺(tái)利用抗壞血酸裂解Au@MnO?NPs納米顆粒產(chǎn)生的強(qiáng)弛豫系數(shù)及其固有的酶樣活性實(shí)現(xiàn)了諾如病毒的檢測(cè)。還發(fā)現(xiàn)在弛豫信號(hào)放大試劑tpps-β-CD(r1=12.56/mM/s)的輔助下,可以顯著提高檢測(cè)的靈敏度。相關(guān)成果以“Multi-signal Biosensors Based on Mn ParamagneticRelaxation and Nanocatalysis for Norovirus Detection”為題發(fā)表在國(guó)際化學(xué)權(quán)威雜志Analytical Chemistry上。
具體而言,研究人員開(kāi)發(fā)了一種基于Mn順磁弛豫和納米催化的多信號(hào)方法來(lái)靈敏檢測(cè)諾如病毒。這種雙模態(tài)傳感平臺(tái)是基于抗壞血酸裂解的Au@MnO?NPs納米顆粒產(chǎn)生的高弛豫率系數(shù)及其固有的酶樣活性。以諾如病毒基因組中最保守區(qū)域(ORF1-ORF2連接處)的cDNA序列為識(shí)別目標(biāo)物(cDNA_NoV),聚苯乙烯包裹的磁性納米顆粒(MNP@PSNPs)和Au@MnO? NPs納米顆粒通過(guò)與分子探針功能化,可用于捕獲cDNA_NoV來(lái)構(gòu)建順磁弛豫傳感平臺(tái)??箟难崮苎杆倭呀釧u@MnO? NPs 納米顆粒的MnO?層,釋放出Mn(II)。其具有強(qiáng)順磁性(3d5,S=5/2),顯示出較強(qiáng)的電子自旋馳豫,產(chǎn)生較大的弛豫率系數(shù),從而使弛豫模式處于“開(kāi)啟”狀態(tài)。
相比之下,Au@MnO? NPs納米顆粒表現(xiàn)出較小的弛豫率系數(shù)。因此,晶體結(jié)構(gòu)的Au@MnO? NPs納米顆粒轉(zhuǎn)變?yōu)槿芤籂顟B(tài)的Mn(II),會(huì)直接產(chǎn)生弛豫信號(hào)的變化。此外,Au@MnO? NPs納米顆粒還能模擬“過(guò)氧化物酶樣”和“氧化酶樣”活性,催化無(wú)色的TMB氧化成藍(lán)色的oxTMB。因此,目標(biāo)物含量可以通過(guò)比色法定量。
用于檢測(cè)諾如病毒的多信號(hào)生物傳感器原理圖
不同價(jià)態(tài)Mn順磁離子的弛豫特性
T1/T2弛豫信號(hào)放大試劑的篩選
牡蠣樣品的分析
綜上所述,為檢測(cè)NoV,研究人員開(kāi)發(fā)了一種基于Mn順磁弛豫和納米催化的多信號(hào)生物傳感器。其中,弛豫模式是基于Mn(II)順磁性離子優(yōu)異的弛豫特性、靈敏且不受光線干擾。比色模式是基于Au@MnO? NPs固有的催化活性使底物顯色,在未來(lái)可開(kāi)發(fā)出NoV的POCT診斷設(shè)備。
在弛豫模式中,T2信號(hào)比T1信號(hào)對(duì)Mn(II)濃度更敏感,tpps-β-CD復(fù)合物增加了Mn (II) 順磁性離子的r1(12.56/mM/s),但降低了r2(18.81/mM/s)。使用tpps-β-CD復(fù)合分子作為弛豫信號(hào)放大試劑提高了方法的靈敏度和檢測(cè)范圍。此外,RT-RPA輔助弛豫/比色法可進(jìn)一步提高靈敏度(LOD:10 copies/mL),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)食品樣品中NoV的超靈敏檢測(cè)。然而,這一過(guò)程需要額外的擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)間(~ 20 min)。
論文鏈接: https://doi.org/10.1021/acs.analchem.3c03950
審核編輯:劉清
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原文標(biāo)題:基于Mn順磁弛豫和納米催化的多信號(hào)生物傳感器,用于諾如病毒的高靈敏檢測(cè)
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