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摘要:本文研究肝X受體(LXR)激動(dòng)劑對(duì)apoE基因敲除小鼠NPC1表達(dá)的影響.52只雄性apoE基因敲除小鼠被隨機(jī)分成4組:(a)基礎(chǔ)組(baselinegroup,n=10);(b)對(duì)照組(controlgroup,n=14);(c)LXR激動(dòng)劑治療組(treatmentgroup,n=14);(d)LXR激動(dòng)劑預(yù)防組(preventiongroup,n=14).各組小鼠均被給予高脂/高膽固醇飼料喂養(yǎng);基礎(chǔ)組小鼠被賦形劑灌胃處理8周;對(duì)照組小鼠被賦形劑灌胃處理14周;LXR激動(dòng)劑治療組小鼠在前8周被賦形劑灌胃處理,后6周被T0901317灌胃處理;LXR激動(dòng)劑預(yù)防組小鼠被T0901317灌胃處理14周.采用實(shí)時(shí)定量PCR,Westernblot和免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)組織中NPC1mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá);采用酶法測(cè)定血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)和載脂蛋白B(ApoB)含量.另外,我們采用RNA干擾技術(shù)沉默人THP-1巨噬細(xì)胞NPC1基因表達(dá),并將細(xì)胞誘導(dǎo)成泡沫細(xì)胞,檢測(cè)T0901317對(duì)該細(xì)胞膽固醇流出的影響.結(jié)果顯示,LXR激動(dòng)劑治療組和預(yù)防組小鼠的血漿TC,TG,HDL-C和ApoA-Ⅰ水平都較對(duì)照組明顯增高(P<0.05);LXR激動(dòng)劑治療組和預(yù)防組小鼠的主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊和脂質(zhì)條紋明顯少于對(duì)照組(P<0.05),其中治療組減少了58.3%,預(yù)防組減少了64.2%;LXR激動(dòng)劑治療組和預(yù)防組小鼠的小腸組織、肝臟組織和主動(dòng)脈NPC1表達(dá)上調(diào)(P<0.05);和正常THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞比較,RNA干擾組膽固醇流出明顯減少,T0901317處理組膽固醇流出明顯增加.總之,LXR激動(dòng)劑T0901317能減輕高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的apoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變程度并上調(diào)肝臟組織、小腸組織和主動(dòng)脈NPC1的表達(dá),NPC1基因沉默能使細(xì)胞膽固醇流出減少.
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